Оценка эффективности децеллюляризации ткани (на примере овечьего митрального клапана)

Аннотация

Резюме
Тканевая инженерия в последние годы стала одним из основных разделов медико-биологической науки, и количество исследований в этой области растет постоянно. Децеллюляризация является одним из способов получения тканевых матриц — одного из основных материалов для последующего создания новой ткани. В настоящий момент не существует единого стандарта оценки качества децеллюляризации, что усложняет работу исследователя и делает результаты разных авторов трудными для сопоставления. зучены результаты децеллюляризации овечьего митрального клапана (п=78) 19 различными растворами, и предложена система оценки качества обработки, включающая три уровня контроля: световая микроскопия (окраска гематоксилин-эозином), ФА на внутриклеточный антиген — ДНК (окраска DAPI) и ФА на мембранассоциированный антиген a-GAL (Lectin I Isolectin B4). Наилучшие результаты показал протокол с постепенно возрастающими концентрациями детергентов (додецил сульфат натрия и дезоксихолат натрия) и добавлением восстанавливающего агента (Р-меркаптоэтанол). При этом было показано, что традиционная световая микроскопия является наименее чувствительным методом контроля, а наиболее объективной была окраска на мембран-ассоциированный антиген a-GAL, наиболее сложный для удаления из ткани и, соответственно, позволяющий наиболее точно оценить качество децеллюляризации. Разработанная трехуровневая система контроля децеллюляризации представляется целесообразной и может быть использована в работах с тканями немлекопитающих животных.

PDF